Wnt-1信号通路靶蛋白WISP-1的原核表达与纯化

• 作者: 丁明建 吴式琇 吴波 宋涛 李伟莉 王孝举 王闻哲
• 来源期刊: 国际流行病学传染病学杂志
• 关键词: 重组蛋白质类 WISP-1蛋白 Halo树脂 共价层析纯化
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 85-88,封3
• 页数: 5页
• 字数: 3638字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2013.02.004

摘要

目的 获得纯度较高的WISP-l蛋白结构域,为进一步升发靶向WISP-1蛋白的药物奠定基础.方法 将编码WISP-l蛋白4个结构域的基因克隆到pFN19A蛋白表达载体中,4个重组质粒分别在大肠埃希菌中诱导表达对应的WISP-1蛋白结构域.用Halo树脂共价层析法纯化目的蛋白.结果 获得了4个重组质粒pFN19A Halo-IGFBP/VWFC/TSP/CTCK.并在KRX敏感菌株中诱导表达目的蛋白,通过优化诱导条件获得4个高表达结构域蛋白.SDS-PAGE和Western印迹特异性条带鉴定纯化蛋白的质量大小与预期一致.经BCA蛋白浓度监测,E2中重组蛋白浓度可达到500～ 1500 mg/L.结论 通过Halo树脂共价层析法,获得了纯度较高的WISP-14个结构域蛋白,为研究WISP-1蛋白在肝癌等肿瘤发生发展过程中的关键功能结构域打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴式琇	杭州市肿瘤医院放疗科	12	102	4.0	10.0
2	李伟莉	浙江省医学科学院分子医学中心	4	15	2.0	3.0
3	王闻哲	浙江省医学科学院分子医学中心	12	31	4.0	5.0
4	王孝举	浙江省医学科学院分子医学中心	18	37	4.0	5.0
5	丁明建	浙江省医学科学院分子医学中心	4	17	2.0	4.0
6	吴波	杭州市肿瘤医院放疗科	1	1	1.0	1.0
7	宋涛	杭州市肿瘤医院放疗科	2	15	1.0	2.0