一种KRAS基因突变检测方法的建立及初步应用

• 作者: 卢敏莹 潘东晓 王倩 罗凯 贺智敏
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 关键词: KRAS 突变 基因测序 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 21-25
• 字数: 4420字
• 语种: 中文

摘要

目的建立一种KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法,并初步探讨其临床应用价值.方法以KRAS基因热点突变区域12、13密码子为研究位点设计特异性扩增、测序引物,利用已知野生型、突变型样品以TA克隆技术构建相应质粒作为标准品,建立KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法,并进行方法学和应用评估.结果成功构建了KRAS基因12、13密码子野生型、突变型质粒.建立了KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法,该方法灵敏度高(9.39×101 copies/uL),重复性好(实时荧光定量PCR部分批内、批间变异系数分别为1.60%、2.54%).该法与传统Sanger测序法同时检测40例临床样品,结果符合率为100%.结论本研究成功建立了可用于临床样品检测的KRAS基因实时荧光定量PCR-Sanger测序突变检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗凯		1	3	1.0	1.0
2	王倩	广州市中医院病理科	11	41	4.0	5.0
3	潘东晓		1	3	1.0	1.0
4	卢敏莹		1	3	1.0	1.0
5	贺智敏		1	3	1.0	1.0