小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导扩增和鉴定

• 作者: 刘斌 向莹 赵越 马东霞
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 诱导 鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 386-390
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 4288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2013.04.003

摘要

目的 体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定.方法 以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4 (rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,脂多糖(LPS)刺激24 h,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,并分别收集悬浮细胞、贴壁细胞,流式细胞术(FACS)分析 DC细胞表面分子CD11c、MHCⅡ类分子、CD80和CD86的表达水平,并应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力.结果 经体外诱导培养第3天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,细胞形态不规则,具有典型DC形态.同组悬浮DC表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86的表达水平高于贴壁DC.LPS刺激24 h后,DC表面MHCⅡ类分子、CD80、CD86的表达水平显著升高,同时可以显著刺激同种异基因淋巴细胞增殖.结论 体外简易诱导培养可以获得高纯度小鼠骨髓来源的各具特性的DC,为开展DC的相关实验研究提供大量稳定的细胞来源.