水牛卵泡液差异蛋白质双向电泳方法的建立及质谱分析

• 作者: 付强 卢克焕 官俊良 张明 潘秋庄 黄凤玲 黄德伦 黄愉淋
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水牛 卵泡液 蛋白质组 双向电泳 质谱鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1244-1250
• 页数: 7页
• 分类号: S823.8+3.2
• 字数: 4255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.08.010

摘要

旨在研究沼泽型水牛成熟前后卵泡内差异表达蛋白质的变化规律.采用双向凝胶电泳技术分离成熟卵泡液和未成熟卵泡液总蛋白质,建立和优化了卵泡液的双向电泳体系,并使用质谱鉴定差异表达蛋白点.结果显示,丙酮沉淀法处理得到的总蛋白质样品后,在24 cm(pH 4～7)胶条且上样量350 μg时得到分辨率较好的双向电泳图谱.软件分析得到11个差异蛋白点,以成熟卵泡液作为对照,5个蛋白点表达上调,3个蛋白点表达下调,1个蛋白点缺失,2个蛋白点在未成熟卵泡液中特异性表达.质谱成功鉴定出4个蛋白质:过氧化物酶-2、醛糖还原酶、牛纤维蛋白原的晶体结构、转甲状腺素蛋白.该研究建立了良好的卵泡液双向电泳体系,分析并鉴定一批水牛卵泡液差异蛋白质,对于研究水牛卵母细胞的发育微环境和成熟机制提供了新的研究线索.