应用RNA干扰技术阻断PC-3细胞中SRC-1基因表达的意义

• 作者: 彭波 翁志梁 黄上明
• 来源期刊: 肿瘤预防与治疗
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 SRC-1 侵袭性 PC-3细胞
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 应用基础研究
• 页码范围: 313-317
• 页数: 5页
• 分类号: R737.25|R730.54
• 字数: 4160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0904.2013.06.001

摘要

目的:探讨RNA干扰技术沉默SRC-1基因后对PC-3细胞生长及侵袭性的影响.方法:将设计好的siRNA,用脂质体法转染PC-3细胞,通过Q-PCR、蛋白免疫印迹检测SRC-1的表达变化,并用CCK-8法检测细胞生长情况,用transwell小室检测PC-3细胞侵袭力.结果:转染SRC-1siRNA24小时后的前列腺癌PC-3细胞系中SRC-1mRNA的相对表达量下降约42%,48小时后下降约79%,差异具有统计学意义(P<0.05);转染24小时、48小时后PC-3细胞SRC-1蛋白的表达量(24h 0.5536±0.071、48h 0.3419±0.025)与阴性对照组(24h 0.8562±0.092、48h 0.8791±0.076)、转染试剂组(24h 0.7992±0.072、48h 0.9731±0.051)和空白对照组(24h 0.8375±0.054、48h 0.8826±0.043)相比明显减少(P<0.05).在转染24小时、48小时、72小时、96小时后PC-3细胞生长情况(吸光度A值:24h 0.324±0.0252、48h 0.689±0.0141、72h 1.0032±0.0166、96h 1.4650±0.0327)与阴性对照组(24h 0.3216±0.0152、48h 0.7014±0.017、72h 0.9902±0.0272、96h 1.4596±0.0141)、转染试剂组(24h 0.3222±0.0343、48h 0.6904±0.0301、72h 0.993±0.0383、96h 1.4574±0.0464)和空白对照组(24h 0.3316±0.0192、48h 0.7092±0.0265、72h 1.0136±0.0130、96h 1.4596±0.0128)比较没有明显变化(P>0.05),但是PC-3细胞的侵袭能力明显下降,干扰实验组的细胞(38±9.01)与阴性对照组(83.33±10.78)、转染试剂组(83.67±10.016)及空白对照组(84.67±11.24)相比较,穿过小室膜的细胞数量明显减少(P<0.05).结论:siRNA有效地阻断了PC-3细胞中SRC-1基因的表达,SRC-1基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),并使转染后的PC-3细胞的侵袭能力下降,但转染后PC-3细胞生长无明显变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翁志梁	温州医学院附属第一医院泌尿外科	95	492	10.0	18.0