CCK-8法与FACS对抗CD3抗体诱导小鼠Treg细胞免疫抑制作用的比较

• 作者: 刘叔文 李晓娟 胡义平
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 调节性T细胞 anti-CD3 免疫抑制 流式细胞仪 CCK-8
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 56-61
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

用非放射性同位素方法检测抗CD3抗体诱导的小鼠调节性T细胞(Treg)对效应性T细胞(Teff)增殖的抑制作用.本实验用丝裂霉素C处理脾细胞获得抗原递呈细胞(APC),用免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4+ CD25+的Treg和CD4+CD25-的Teff,二者按1:2比例与APC共培养,并加入anti-CD3抗体刺激3d,加CCK-8孵育检测细胞增殖.另外,CFSE标记Teff,与Treg共同培养,加入anti-CD3抗体刺激3d,流式细胞仪分析Treg对Teff增殖的抑制作用.流式分析表明,0.1 mg/L、1 mg/L的anti-CD3抗体均能明显促进Teff细胞增殖,加Treg细胞能明显减低细胞增殖的比例和减少增殖的代数.anti-CD3抗体剂量增加到1 mg/L,Teff的增殖较0.1 mg/L剂量刺激时没有明显改变,但Treg的抑制功能减弱了.CCK-8法与流式检测得出的结果一致.CCK-8法和流式细胞术(FACS)均可以用来检测Treg细胞的免疫抑制作用,并且采用0.1 mg/L anti-CD3抗体刺激,对Treg细胞免疫抑制作用的检测效果更好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘叔文		92	422	10.0	13.0
2	李晓娟		17	70	5.0	8.0
3	胡义平		9	35	3.0	5.0