假坚强芽胞杆菌中乙醇降解相关酶的克隆、表达及酶学特性

• 作者: 刘景伟 徐书景 赵冉冉 赵宝华 鞠建松 马宁
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 假坚强芽胞杆菌 乙醛脱氢酶 乙醇脱氢酶 乙醇耐受性 共表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 363-371
• 分类号: Q814
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究假坚强芽胞杆菌OF4中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酶学特性.[方法]通过引物设计,采用PCR技术从嗜碱芽胞杆菌OF4的基因组DNA中扩增获得乙醇脱氢酶(adh)基因和乙醛脱氢酶(aldh)基因,构建表达载体,通过异源原核表达,Ni-NTA柱层析纯化酶蛋白,分析其酶学特性.[结果]乙醛脱氢酶的最适反应温度为35℃,最适反应pH值为8.0,酶蛋白的活力为979.6 U/mg,其稳定性在25℃和35℃下比45℃稍好；尽管由于乙醇脱氢酶的表达量低而未能纯化获得酶蛋白,但通过双基因共表达及乙醇耐受性实验发现乙醇脱氢酶也具备较高的催化活性.[结论]成功地从假坚强芽胞杆菌OF4中克隆获得了乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶基因,二者共同作用能够较大提高宿主对乙醇的耐受性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宝华	河北师范大学生命科学学院	238	1801	20.0	28.0
2	徐书景	河北师范大学旅游学院	22	63	5.0	6.0
3	鞠建松	河北师范大学生命科学学院	25	67	5.0	6.0
4	马宁	河北师范大学生命科学学院	6	14	2.0	3.0
5	刘景伟		5	14	2.0	3.0
6	赵冉冉	河北师范大学生命科学学院	2	7	2.0	2.0