假交替单胞菌JMUZ2重组κ-卡拉胶酶的异源表达和酶学性质

• 作者: 张成昊 朱艳冰 陈艳红 姜泽东 倪辉 李清彪
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 假交替单胞菌 κ-卡拉胶酶 酶学性质 酶解产物 抗氧化活性
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 3738-3746
• 页数: 8页
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.11949/0438-1157.20201827

摘要

将假交替单胞菌JMUZ2的κ-卡拉胶酶基因在大肠杆菌中异源表达，利用亲和层析对重组κ-卡拉胶酶进行分离纯化，表征重组酶的酶学性质，利用质谱分析κ-卡拉胶的酶解产物，并进行产物的抗氧化活性分析。结果表明，假交替单胞菌JMUZ2的κ-卡拉胶酶属于GH16家族，能专一性降解κ-卡拉胶，重组κ-卡拉胶酶的最适反应温度和pH分别为50℃和8.0，在40℃条件下处理1h，保持约80%残余活力。重组酶对去垢剂Tween20、Tween80和TritonX-100有良好的耐受性。LC-MS分析显示，重组酶水解κ-卡拉胶的终产物为二糖和四糖。酶解产物对·OH自由基、DPPH自由基、ABTS自由基具有一定清除作用，还具有良好的还原能力。重组κ-卡拉胶酶的酶学性质及酶解产物的分析为该酶用于κ-卡拉胶寡糖绿色制备的应用奠定理论基础。