鸡传染性法氏囊病病毒 RT-PCR 检测方法的建立与应用

• 作者: 刘建利 卢体康 吕建强 孙洁 廖立珊 张彩虹 曹琛福 曾少灵 杨俊兴 林庆燕 秦智锋 花群义 詹爱军 阮周曦 陈兵 陶虹
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性法氏囊病 常规 RT-PCR 实时荧光定量 RT-PCR 快速检测
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5527字
• 语种: 中文

摘要

鸡传染性法氏囊病（IBD）是危害我国养禽业的主要疫病之一，呈世界性分布，对养鸡业造成重大危害。在国际种禽贸易中，对 IBDV 检测是口岸检疫的主要对象之一。为了建立标准的鸡传染性法氏囊病病毒分子检测方法，采用世界动物卫生组织（OIE）推荐的带有通用引物和酶切位点的特异性引物，通过对6株不同毒株的反复试验，优化了针对 A 片段 VP2基因的常规反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测方法（IBDV-VP2（604）-RT-PCR）和针对 B 片段 VP1基因的 RT-PCR 检测方法（IBDV-VP1（642）-RT-PCR）；针对 A 片段 VP2基因设计特异性引物和探针，建立了优化 IBDV 特异性实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（rRT-PCR）检测方法（IBDV-VP2-rRT-PCR）。将传染性法氏囊病疫苗-法倍灵（IBDV-BLEN）疫苗株进行系列稀释，两种 RT-PCR 检测方法的灵敏度均为10-3，而 IBDV-VP2-rRT-PCR 检测方法灵敏度为10-4。所建立的三种分子生物学检测方法特异，与其他家禽病毒无任何交叉反应。通过对自2007年以来18批221份田间样品检测表明，所建立的方法准确可靠，适合对鸡传染性法氏囊病病毒进行快速灵敏检测和监测。