禽多杀性巴氏杆菌C48-3株ompH基因敲除突变株的构建及其生物学功能

• 作者: 吾鲁木汗·那孜尔别克 张宇凤 恩特马克·布拉提白 泽田拓士 龚凤娟
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 禽多杀性巴氏杆菌 ompH基因 敲除突变 粘附 致病性
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 侵染和免疫
• 页码范围: 66-73
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

[目的]探讨ompH基因在禽多杀性巴氏杆菌致病过程中的作用.[方法]利用同源重组原理构建中间为四环素抗性基因,两侧为ompH基因上下游同源序列同源的敲除载体pWSK29△ompH,将敲除载体电击转入C48-3株感受态细胞中,通过四环素抗性和菌落PCR筛选ompH基因的敲除突变株,并通过组合PCR、逆转录PCR和DNA测序对突变株进行验证.用生物学功能实验比较野生株、互补株和突变株在生长速率、荚膜结构、粘着能力和致病性等方面的差异.[结果]组合PCR、逆转录PCR和DNA测序结果证实ompH基因的敲除突变株C48-3△ompH构建成功,电镜观察结果证实ompH基因的缺陷影响细菌的荚膜合成能力,粘附实验结果显示与野生株C48-3和互补株C48-3C相比突变株C48-3△ompH对CEF细胞的粘附能力显著降低(P＜0.01),而小鼠毒力实验结果表明突变株C48-3△ompH的致病性相对减弱.[结论]本实验构建的突变株C48-3△ompH,为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚凤娟	吉首大学生物资源与环境科学学院	7	59	4.0	7.0
2	吾鲁木汗·那孜尔别克	吉首大学生物资源与环境科学学院	19	142	8.0	11.0
3	恩特马克·布拉提白	吉首大学生物资源与环境科学学院	22	163	8.0	11.0
4	张宇凤	吉首大学生物资源与环境科学学院	4	54	3.0	4.0