狼尾蕨基因组DNA提取及SSR反应体系的建立

• 作者: 佘建明 叶晓青 孙晓波 梁丽建 贾新平 邓衍明
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 狼尾蕨 DNA提取 SSR 反应体系
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 1456-1462
• 页数: 7页
• 分类号: S682.35
• 字数: 4811字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2013.06.044

摘要

为了研究蕨类植物基因组DNA的提取方法及建立适合狼尾蕨的SSR-PCR反应体系,以狼尾蕨为试验材料,利用改良的CTAB方法提取狼尾蕨叶片基因组DNA,分析SSR-PCR反应体系的主要成分(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq DNA聚合酶)对扩增结果的影响,并对引物的适宜退火温度进行优化.结果表明:引物DB-23的最佳退火温度为54℃;20 μl PCR反应体系中,DNA模板浓度为30 ng/μl,引物浓度为1.5μμmol/L,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.20 mmol/L,Taq DNA聚合酶加入量为1.5U.利用建成的SSR-PCR反应体系对8个蕨类品种进行扩增,扩增谱带清晰且有较高的多态性,说明该体系稳定可靠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	佘建明	江苏省农业科学院农业生物技术研究所江苏省农业生物学重点实验室	44	597	15.0	22.0
2	叶晓青	江苏省农业科学院农业生物技术研究所江苏省农业生物学重点实验室	35	342	10.0	17.0
3	邓衍明	江苏省农业科学院农业生物技术研究所江苏省农业生物学重点实验室	21	242	7.0	15.0
4	梁丽建	江苏省农业科学院农业生物技术研究所江苏省农业生物学重点实验室	18	162	5.0	12.0
5	贾新平	江苏省农业科学院农业生物技术研究所江苏省农业生物学重点实验室	21	171	5.0	12.0