九眼独活基因组DNA提取、ISSR反应体系优化及引物筛选

• 作者: 侯大斌 刘向鸿 徐敏 王博
• 来源期刊: 西北药学杂志
• 关键词: 九眼独活 DNA提取 ISSR-PCR反应体系 引物筛选
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 265-267
• 分类号: R284
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-2407.2010.04.014

摘要

目的 探讨九眼独活基因组DNA提取方法 、ISSR反应体系优化及引物筛选,为研究九眼独活居群遗传多样性及原药材DNA鉴定奠定基础.方法 采用改良的CTAB法与常规CTAB法对九眼独活的基因组进行提取,通过紫外、电泳、PCR-ISSR检测方法 进行比较.结果实验表明,改良的CTAB法得到的DNA浓度和纯度较高,并可很好地应用于ISSR分子标记分析;以Mg2+、dNTP、引物和聚合酶建立L9(34)正交设计,并同时考察退火温度和模板浓度,建立适宜的25 μL ISSR-PCR体系为:模板 30 ng,Mg2+ 3.5 mmol·L-1,dNTP 0.6 mmol·L-1,引物0.4 μmol·L-1,Taq酶1 U.结论 以此体系为基础进行引物筛选,在40条ISSR引物中筛选出13 条扩增条带清晰、多态性较高、重复性好的引物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯大斌	西南科技大学生命科学与工程学院	95	679	13.0	22.0
2	王博	西南科技大学生命科学与工程学院	5	21	3.0	4.0
3	徐敏	西南科技大学生命科学与工程学院	10	67	5.0	8.0
4	刘向鸿	西南科技大学生命科学与工程学院	6	54	4.0	6.0