洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系的建立

• 作者: 张仑 殷幼平 王中康 高文娜
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 唐菖蒲伯克霍尔德菌洋葱致病菌 洋葱腐烂病菌 荧光定量PCR 种子模拟带菌检测
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 技术改进
• 页码范围: 367-372
• 页数: 6页
• 字数: 3998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.03.014

摘要

唐菖蒲伯克霍尔德菌洋葱致病型(Burkholderia gladioli pv.alliicola),是重要的植物病原细菌检疫性有害生物.本研究的目的是建立特异、灵敏、快速的TaqMan探针荧光定量PCR方法用于检测洋葱腐烂病菌(B.gladioli pv.alliicola).利用洋葱腐烂病菌保守基因序列设计和筛选特异性引物和TaqMan探针,优化PCR反应体系和反应条件.荧光定量PCR菌液检测灵敏度达到1.02×102 CFU/mL,DNA检测灵敏度达到1.73×10-4 ng/μL,反应时间仅需1h左右,对14种伯克氏菌属Burkholderia)参比菌种的特异性检测结果显示,洋葱腐烂病菌具有明显的扩增曲线生长,表明建立的荧光定量PCR体系具有非常高的特异性.同时对洋葱(Allium cepa)种子进行了模拟带菌检测,结果表明,建立的洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系能够检出模拟样品中的洋葱腐烂病菌,验证了检测体系的实用性.本研究建立的洋葱腐烂病菌荧光定量PCR检测体系能够有效用于洋葱腐烂病菌的鉴定,为进出口口岸和基层检验检疫部门提供了一种简便、快速、准确的洋葱腐烂病菌分子检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王中康	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	57	766	16.0	25.0
2	殷幼平	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	57	718	14.0	23.0
3	高文娜		18	86	6.0	7.0
4	张仑	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	3	17	2.0	3.0