慢病毒介导的siRNA靶向CD47基因对人喉癌细胞Hep-2增殖、凋亡的影响

• 作者: 万俊 刘建国 刘月辉 张少容 徐莲 李黎 杨春平 汪美群 高树峰
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD47 慢病毒载体 RNA干扰 Hep-2细胞 基因沉默
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 634-638
• 分类号: R739.65
• 语种: 中文

摘要

目的 探究慢病毒载体介导siRNA抑制CD47基因表达后对人喉癌细胞株Hep-2体外增殖凋亡的影响.方法 构建慢病毒载体,将靶向CD47基因的siRNA慢病毒转染至Hep-2细胞；用荧光显微镜行细胞形态学变化观察；RT-PCR检测细胞CD47 mRNA表达的变化；Western blotting检测CD47蛋白表达的变化情况；MTT法检测细胞的增殖凋亡情况.结果 CD47-siRNA慢病毒转染Hep-2细胞后,形态学观察显示CD47-siRNA能有效抑制Hep-2细胞增殖,细胞变形明显,体积变小,可见细胞坏死及凋亡.RT-PCR和Western blotting检测显示,CD47的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),使CD47 mRNA表达减少76％～82％,CD47蛋白表达减少77％；慢病毒转染细胞在48h后MTT检测细胞凋亡率明显提高(P＜0.01).结论 慢病毒介导的siRNA干扰CD47基因表达后,明显抑制了喉癌Hep-2细胞CD47的表达并且诱导了Hep-2凋亡.