Livin基因siRNA慢病毒表达载体的构建及其对喉癌细胞HEP-2增殖的影响

• 作者: 冯俊 彭涛 李丽 杨久梅
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Livin基因 喉癌细胞 siRNA 慢病毒载体 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1068-1074
• 页数: 7页
• 分类号: R739.65
• 字数: 4413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2018.09.013

摘要

目的 构建及鉴定Livin基因siRNA慢病毒表达载体并观察其对喉癌细胞HEP-2增殖的影响. 方法 从基因库获得Livin基因序列,设计3段siRNA序列;经Mlu Ⅰ和ClaⅠ双酶切后克隆人慢病毒表达载体pLenOR-THM,构建pknOR-THM-Livin-siRNA重组质粒,将其转化感受态细菌DH5α,对阳性克隆进行筛选后,用EcoR Ⅰ和XbaⅠ双酶切及测序鉴定正确后用脂质体转染293T细胞包装病毒颗粒,感染293T细胞及HEP-2细胞,用荧光定量PCR检测其对HEP-2增殖的影响. 结果 慢病毒表达载体pLenOR-THM-Livin-siRNA被成功构建;转染293T细胞组装病毒液有绿色荧光,并主要表达在细胞膜上;浓缩后的病毒液感染293T细胞及HEP-2细胞均有绿色荧光表达.SH2-R组的Livin蛋白相对表达量最低为(12.31±4.43)％;SH2-R组与SH2-F、NC组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 成功构建了Livin基因siRNA慢病毒载体;HEP-2细胞Livin蛋白表达受到抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李丽	川北医学院病理学教研室	32	74	6.0	7.0