IRE1α重组腺病毒载体对ATDC5软骨干细胞增殖及凋亡的影响

• 作者: 夏飞 张鹏 李祥柱 李美玲 郭风劲 韩晓凤
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IRE1α 腺病毒科 ATDC5细胞 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 639-643
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文

摘要

目的 构建重组人IRE1α腺病毒,观察其对软骨干细胞ATDC5增殖与凋亡的影响.方法 应用pAdEasyTM腺病毒载体系统构建包含全长IRE1α基因和RNase+Kinase核心结构域的重组穿梭质粒pAdTrack-IRE1α、pAdTrack-R+K,通过电转法分别与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,获得重组腺病毒pAd-IRE1α、pAd-R+K.随后在HEK-293细胞中包装并扩增重组腺病毒颗粒Ad-IRE1α、Ad-R+K.用直接PCR法鉴定重组腺病毒,后者体外感染软骨干细胞ATDC5,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)感染效率,并应用流式细胞仪分别检测在内质网应激(ERS)和非ERS状态时重组腺病毒对ATDC5细胞增殖和凋亡的影响.结果 酶切鉴定和PCR证实成功构建了重组腺病毒质粒pAd-IRE1α、pAd-R+K.流式细胞仪检测结果显示,在ERS状态时,重组腺病毒质粒Ad-IRE1α、Ad-R+K感染后ATDC5细胞G1期比例明显降低,S期细胞比例明显升高(P＜0.05),细胞凋亡率明显增高(P＜0.05).结论 含IRE1α基因的重组腺病毒感染可促进ATDC5细胞的增殖和凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张鹏	重庆重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	4	20	3.0	4.0
2	李祥柱	重庆市璧山县人民医院输血科	4	9	2.0	3.0
3	韩晓凤	重庆重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	1	7	1.0	1.0
4	李美玲	重庆重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	1	7	1.0	1.0
5	夏飞	重庆重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	1	7	1.0	1.0
6	郭风劲	重庆重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	2	22	2.0	2.0