抗NPM1单克隆抗体的制备

• 作者: 令狐志宏 何成彦 宋丽娜 师庆红 李丽红 杨光远 赵海丰 鄢超 高申
• 来源期刊: 标记免疫分析与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 核仁磷酸化蛋白NPM1 单克隆抗体 细胞融合 结直肠癌
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 方法研究
• 页码范围: 322-324
• 页数: 3页
• 分类号: R730.3
• 字数: 2270字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2013.05.014

摘要

目的 制备并鉴定NPM1单克隆抗体.方法 利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗NPM1单克隆抗体的特性进行分析.结果 筛选出1株产生抗NPM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,产生的抗体为IgGl亚类,效价达1∶720000;纯化后经SDS-PAGE显示两条蛋白条带,纯度达95％以上,相对分子质量约为50000和25000,与单一抗体重链、轻链分子大小相符.免疫组化证实,纯化的2G7抗NPM1单克隆抗体可检测出NPM1在结直肠癌表达,阳性位点为细胞核.结论 制备的抗NPM1单克隆抗体可用于NPM1蛋白功能的研究与临床检测.