利用不同基因转移方法构建转基因红鲤

• 作者: 汤泽源 胡铭炎 薛良义
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: Tol2 大黄鱼肌肉生长抑素前肽 转基因 生长
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 19-28
• 页数: 10页
• 字数: 8074字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.01.003

摘要

本实验研究了大黄鱼肌肉生长抑素前肽基因对红鲤的促生长作用.分别通过RT-PCR和PCR从大黄鱼(Larimichtys crocea)和pIRES-EGFP质粒扩增得到了肌肉生长抑素(MSTN)前肽基因及核糖体内部进入位点序列(IRES)-增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)片段,经测序验证正确后,构建了Tol2转座子供体质粒pT2AL200R150G-MSTⅣpropepti de-IRES-EGFP.通过精子介导法(S1、S2组)、电穿孔法(E1、E2组)及基因枪法构建转基因红鲤(Cyprinus carpio),孵化72 h后的鱼苗经荧光显微镜检测,EGFP表达阳性率为:精子介导法S1组38％,精子介导法S2组48％,电穿孔E1组47％,电穿孔E2组53％,基因枪组2％;孵化10d的仔鱼RT-PCR检测EGFP和MSTN前肽基因阳性率为:精子介导法S1组35％,精子介导法S2组45％,电穿孔E1组45％,电穿孔E2组55％,基因枪组1.8％.孵化后75 d转基因红鲤与对照组相比,体长和体重分别提高了21.31％和27.59％.本实验结果表明,精子经高渗、低渗保存剂处理并通过电穿孔作用可大幅提高基因转移效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛良义	宁波大学海洋学院	82	601	14.0	21.0
2	胡铭炎	宁波大学海洋学院	2	6	1.0	2.0
3	汤泽源	宁波大学海洋学院	2	10	2.0	2.0