人源蛋白激酶B的原核表达研究

• 作者: 张元新 葛雅琨
• 来源期刊: 吉林化工学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PKB 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 页码范围: 106-109
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 2579字
• 语种: 中文

摘要

确定人源PKB在大肠杆菌中的表达条件.方法构建PKB原核表达质粒pET-28-PKB,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,通过改变诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度和菌体浓度确定了PKB的最佳表达条件,并初步纯化PKB蛋白.结果确定了重组菌株的最佳表达条件为:37℃、200 r/min培养2h后,28℃、1 mmol/L IPTG诱导培养8h.超声破碎菌体,经8M尿素变性、12 000 rpm/min离心和亲和层析,获得了纯化的PKB.结论为PKB蛋白的表达纯化建立了可行性的技术方案.