JNK信号通路对NaAsO2诱导NIH3T3细胞中hnRNP K蛋白聚集体形成的影响

• 作者: 唐昭亮 姜勇 姜枫 樊启黄 胡水旺
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 核不均一核糖核蛋白K 亚砷酸钠 聚集体 JNK信号通路
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1070-1075
• 页数: 6页
• 分类号: Q256
• 字数: 5068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.06.020

摘要

目的:观察核不均一核糖核蛋白(hnRNP)K的表达与定位以及亚砷酸钠(NaAsO2)刺激NIH3T3细胞的反应情况及氧化应激变化,探讨JNK信号通路在hnRNP K蛋白聚集体形成中的作用.方法:构建重组载体pcDNA3-hnRNP K-HA,转染NIH3T3细胞,荧光显微镜观察内源性hnRNP K在细胞中的表达与定位,以及在NaAsO2不同刺激时间该蛋白聚集体的形成情况,并利用活性氧(ROS)检测试剂盒测定胞内ROS水平；给予JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB和核转运等5种信号通路的抑制剂预处理后,观察聚集体的变化情况.结果:重组质粒构建正确,荧光显微镜观察显示hnRNP K主要定位于胞核中,而重组质粒转染NIH3T3细胞后,可见胞内有蛋白聚集体形成并随NaAsO2刺激时间的延长而递增,且过表达hnRNP K可抑制NaAsO2刺激细胞生成ROS; JNK信号通路抑制剂SP600125明显抑制聚集体的形成.结论:hnRNP K主要定位在NIH3T3细胞的胞核中,胞浆少量分布；NaAsO2可诱导NIH3T3细胞形成hnRNP K蛋白聚集体,此聚集体可抑制胞内ROS生成,且该聚集体的形成有赖于JNK介导的信号通路.