ERα通路代偿性激活在乳腺癌细胞的拉帕替尼获得性耐药中的作用

• 作者: 常涛 房林 方国恩 李喆 杨生生 石林祥
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 拉帕替尼 乳腺肿瘤 肿瘤抗药性 雌激素受体α erbB-2受体
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 616-622
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2013.00616

摘要

目的 了解雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)通路代偿性激活在乳腺癌细胞BT474的拉帕替尼获得性耐药发生过程中的作用和可能机制.方法 利用real-time PCR和蛋白质印迹检测BT474被拉帕替尼作用后人表皮生长因子受体2 (HER2)通路和ERα通路活性的改变；利用拉帕替尼浓度递增、持续培养的方法建立乳腺癌细胞BT474的拉帕替尼获得性耐药细胞(rBT474)模型；采用流式细胞术检测拉帕替尼对rBT474细胞凋亡的影响,进一步以蛋白质印迹法分析BT474和rBT474在HER2通路和ER通路上的差别；应用MTT法检测rBT474在拉帕替尼和氟维司群作用下的生长情况；利用克隆形成实验观察双靶点治疗对预防拉帕替尼获得性耐药的可能性.结果 Real-time PCR和蛋白质印迹检测显示拉帕替尼抑制BT474细胞HER2磷酸化,同时诱导叉头蛋白3A (FOXO3a)和孕激素受体(PR)的表达升高；成功获得的耐药细胞株rBT474在含有5μmol/L拉帕替尼的培养液中仍可持续生长；蛋白质印迹结果显示,rBT474细胞与BT474细胞相比,其磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路受抑制,而促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)通路激活,ER通路的活化更加明显；MTT法检测结果显示,与单用拉帕替尼相比,联合使用拉帕替尼和氟维司群可抑制rBT474细胞活力(P＜0.01)；克隆形成实验结果表明,与二甲亚砜组、拉帕替尼组和氟维司群组相比,拉帕替尼和氟维司群联合用药组可抑制BT474细胞克隆形成(P＜0.01),具有预防获得性耐药发生的可能.结论 ERα通路的代偿性激活可能是导致HER2(+)/ERα(+)的乳腺癌细胞对拉帕替尼产生获得性耐药的机制之一,而PI3K/AKT抑制和MAPK激活可能是ERα代偿激活的主要原因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方国恩	第二军医大学长海医院普通外科	132	928	17.0	25.0
2	房林	同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科	53	188	7.0	9.0
3	杨生生	第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室	27	104	6.0	9.0
4	李喆	同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科	11	67	4.0	8.0
5	石林祥	同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科	18	92	6.0	9.0
6	常涛	同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科	8	75	5.0	8.0