脂质体介导Cyclin D1干扰RNA对人肝癌细胞株HepG2全细胞蛋白质组表达的影响

• 作者: 白瑞霞 谭艳 赵鹏伟 韩晓芳
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: 脂质体 细胞周期蛋白D1 RNA干扰 肝肿瘤/病理学 细胞凋亡 肿瘤细胞,培养的 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1635-1640
• 页数: 6页
• 字数: 4149字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2013.12.015

摘要

目的 探讨Cyclin D1干扰RNA对人肝癌细胞株HepG2细胞中Cyclin D1 mRNA的表达、对细胞周期和增殖以及蛋白质组表达变化的影响.方法构建Cyclin D1干扰RNA的重组质粒pU6-Cyclin D1-siRNA,并设立阴性对照空载体转染组和空白对照组.采用脂质体介导转染肝癌细胞株HepG2细胞,经G418筛选阳性转染细胞克隆,流式细胞术、MTT法检测其细胞周期、细胞生长曲线的改变;反转录PCR法及双向凝胶电泳-质谱技术比较转染前后Cyclin D1 mRNA的表达和蛋白质组表达的变化.结果⑴成功构建了Cyclin D1干扰RNA的重组质粒pU6-Cyclin D1-siRNA.并获得稳定转染组细胞HepG2-Cyclin D1 siRNA.⑵稳定转染组细胞与阴性对照组细胞和空白对照组相比,Cyclin D1 mRNA表达水平降低.细胞周期明显改变,从G1期到S期发生阻滞.⑶通过双向电泳-图像分析-质谱技术得到稳定转染组低表达蛋白6个,经数据库搜索分别是锌指蛋白ZFP-36、角蛋白19、热休克蛋白伴侣素10、波形蛋白、肿瘤拒绝抗原gp96、未知蛋白.这些蛋白与细胞的增殖、细胞凋亡的信号转导调节、以及肿瘤的发生、发展等相关.结论 Cyclin D1干扰RNA可明显降低肝癌HepG2细胞Cyclin D1 mRNA的表达,亦可阻滞肝癌HepG2的细胞周期,抑制细胞增殖;Cyclin D1干扰RNA干扰后差异表达的蛋白质涉及细胞的增殖、细胞凋亡的信号转导调节、以及肿瘤的发生、发展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵鹏伟	内蒙古医科大学基础医学院病原生物与免疫学研究室	46	147	5.0	10.0
2	白瑞霞	内蒙古自治区人民医院检验科	22	33	3.0	4.0
3	谭艳	内蒙古自治区人民医院检验科	32	87	5.0	8.0
4	韩晓芳	内蒙古自治区人民医院检验科	35	112	6.0	9.0