小鼠生精细胞体外培养过程中印迹基因H19和IGF2r甲基化状态

• 作者: 姜宏 张文香 汪存利 袁韦娜
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: 生精细胞 体外培养 印迹基因 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 678-682
• 页数: 5页
• 字数: 4309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2013.06.010

摘要

目的 通过对体外培养获取的昆明白小鼠单倍体精子细胞印迹基因H19印迹控制区(imprinting control region,ICR)和IGF2r差异甲基化区(differentially methylated region,DMR2)甲基化状态的检测,初步评估体外培养对生精细胞印迹基因甲基化状态的影响.方法 应用亚硫酸氢盐测序技术,以印迹基因H19 ICR和IGF2r DMR2区为扩增目的区域,对经体外培养获得的单倍体精子细胞进行甲基化修饰后巢式和半巢式PCR扩增,应用DNAman软件对特异性扩增产物测序分析,与GenBank相对应的序列比对,判断其甲基化状态,并与小鼠附睾内成熟精子进行比较.结果 小鼠成熟精子中H19 ICR区15个CpG位点呈高度甲基化状态(96.67％),IGF2r DMR2区呈非甲基化状态(94.29％);而经体外培养获得的单倍体精子细胞H19 ICR区甲基化程度显著降低(69.33％,P＜0.01),IGF2r DMR2区甲基化程度显著增加(44.29％,P＜0.01).结论 昆明白小鼠成熟精子中H19 ICR区呈高度甲基化状态;IGF2r DMR2区呈非甲基化状态;体外培养产生的单倍体精子细胞H19 ICR区出现了广泛的甲基化丢失,IGF2r DMR2区出现了异常甲基化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪存利	解放军第105医院生殖医学中心	19	38	4.0	4.0
2	张文香	解放军第105医院生殖医学中心	33	41	4.0	5.0