空肠弯曲菌FlhF单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 任方哲 商宇伟 焦新安 王楠 黄金林
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: FlhF蛋白 空肠弯曲菌 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 1294-1298
• 分类号: Q813.2|R392-33|R446.61
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达空肠弯曲菌FlhF蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb).方法 扩增空肠弯曲菌flhF基因并将其插入到pET-30a(+)和pGEX-6p-1表达载体,分别以亲和纯化柱纯化后的蛋白rHis-FlhF和rGST-FlhF为免疫原和检测原进行杂交瘤细胞的筛选.采用间接ELISA测定mAb腹水效价,Dot-ELISA、Western blot分析mAb特异性.结果 成功构建重组原核表达质粒pET-30a(+)-flhF和pGEX-6p-1-flhF,并融合表达rHis-FlhF和rGST-FlhF蛋白.筛选获得2株稳定分泌抗FlhF的单克隆杂交瘤细胞株,分别命名为2C12和7A9,其Ig亚类均为IgG1,腹水效价分别为1×109和2 ×107,Western blot法分析表明2株mAb 均能与纯化蛋白rHis-FlhF有良好的反应性,Dot-ELISA试验表明2株mAb均能与空肠弯曲菌标准株发生特异性反应.结论 成功制备了具有较高特异性的空肠弯曲菌FlhF蛋白的mAb.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦新安	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	249	2602	25.0	38.0
2	黄金林	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	115	959	16.0	26.0
3	王楠	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	5	9	2.0	3.0
4	商宇伟	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	3	9	2.0	3.0
5	任方哲	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	3	7	1.0	2.0