茎-环反转录实时PCR技术分析miR-93和miR-342在乳腺癌细胞系中的表达*

• 作者: 傅俊江 刘晓燕 杨曼曼 杨璐全 杨维婵 魏春莉 龙燕
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 茎-环反转录 实时PCR miR-93 miR-342 乳腺癌细胞系 表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 页码范围: 315-319
• 页数: 5页
• 分类号: R394.33
• 字数: 2938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2013.04.001

摘要

目的：应用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测分析小的非编码分子miR-342和miR-93在乳腺癌细胞中的表达。方法：用miR特异性试剂盒（miRNeasy Mini Kit）提取了总RNA和miRNA，进行特异性茎-环反转录和实时PCR( stem-loop reverse transcription real-time PCR, stem-loop RT-qPCR)，检测miR-342和miR-93在5种乳腺癌细胞中的表达，并进行比较分析。结果：用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测发现miR-93在T47D细胞系中呈非常高的表达，BT-549和MCF7细胞系中呈相对高表达，在MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞系低表达；而miR-342在MCF7中呈非常高的表达，MDA-MB-231，BT-549和T47D中呈相对低表达，在MDA-MB-435中表达特别低。结论：miR-93和miR-342的表达在某种程度上与乳腺癌细胞高侵袭性呈一定负相关，表明miR-93和miR-342可能是乳腺癌的抑癌基因并可能具有抑制其转移的作用，为深入分析miR-93和miR-342抑制乳腺癌转移的作用机制奠定了基础。