重组exendin-4类似物EW的制备及其体内降糖活性分析

• 作者: 吴晓琰 施小梅 陆怡
• 来源期刊: 中国临床医学
• 学科: 医学
• 关键词: exendin-4类似物 EW 表达 纯化 降糖活性
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 263-266
• 页数: 4页
• 分类号: R587.1
• 字数: 3807字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨重组exendin-4类似物EW的基因工程制备方法及纯化后的体内降糖活性.方法:设计引物并以PCR法扩增EW基因,其N-端具有胰蛋白酶的酶切位点,C-端具有终止密码子,通过串联的方式在大肠杆菌JM109中高效表达.包涵体纯化后,通过胰蛋白酶对融合蛋白进行酶解,继而纯化,获得重组EW.测定腹腔内注射EW、exendin-4及0.9％氯化钠溶液后C57BL/6小鼠体内血糖情况.结果:将串联8个EW拷贝后的8EW基因在大肠杆菌中表达,获得的包涵体经过增溶保护后以胰蛋白酶酶切获得EW,重组EW的收率为200～250 mg/L发酵液.纯化冷冻干燥后的EW在C57BL/6小鼠体内降糖活性与exendin-4相当.结论:基因工程制备的EW是一种很有前景的抗糖尿病药物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆怡	复旦大学附属华山医院老年科	42	203	8.0	13.0
2	吴晓琰	复旦大学附属华山医院老年科	25	78	4.0	8.0
3	施小梅	复旦大学附属华山医院老年科	16	199	7.0	14.0