转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化

• 作者: 孙红炜 张广远 李凡 杨淑珂 赵蕾 路兴波
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 转化体特异性 MIR162 定性PCR TaqMan探针实时荧光PCR 标准化
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 1141-1147
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.01141

摘要

转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种.本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准.定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异性强,灵敏度较高(0.1％),具有良好的重复性和再现性.TaqMan探针实时荧光PCR检测结果表明,所设计的探针特异性强,检测低限(LOD)在0.01％以下;定量标准曲线R2均为0.999,扩增效率为98.622％和99.602％,SD范围为0.014～0.209,RSD的范围为0.049％～0.879％,稳定性好;对转基因含量为1.0％、0.5％、0.1％的样品定量结果相对偏差在8.0％以内,结果较为准确.本研究建立的方法完全可用于含转基因玉米MIR 162成分样品的检测.