栉孔扇贝骨形态发生蛋白2基因的克隆及表达分析

• 作者: 于茜 包振民 封利颖 张玲玲 李雪 王师 胡晓丽 郭慧慧
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 栉孔扇贝 骨形态发生蛋白2 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 48-55
• 页数: 8页
• 分类号: S917.4
• 字数: 5439字
• 语种: 中文

摘要

骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)家族成员在动物的骨骼发育及器官形成中发挥着重要作用.本文利用同源克隆策略获得栉孔扇贝(Chlamys arreri)BMP2基因(CfBMP2)的全长cDNA和基因组DNA序列.其中,DNA序列长度为11 252 bp,由3个外显子和2个内含子组成;cDNA序列全长3 562 bp,含有1 221 bp开放阅读框,编码406个氨基酸,与合浦珠母贝(P inctada ucata)、长牡蛎(Crassostrea gigas)、斑马鱼(Danio rerio)和人(Homo sapiens)的同源蛋白相似性分别为67％、51％、59％和57％.运用实时荧光定量反转录PCR技术(qRT-PCR)对CfBMP2基因的时空表达进行分析.结果表明,在栉孔扇贝早期胚胎中几乎检测不到CfBMP2 mRNA,从囊胚期开始有少量该基因表达,在原肠胚时期表达量显著上升,至幼虫期表达量又显著下降.除原肠胚外,在检测的其它发育时期,包括受精卵、4细胞期、担轮幼虫、D型幼虫和壳顶幼虫间,CfBMP2基因表达量没有显著差异.在取样的成体组织中均检测到CfBMP2基因的表达.其中,鳃中C fBMP2的表达量显著高于其它组织,外套膜次之.在横纹肌、性腺、肾和消化腺中,CfBMP2表达量较低且在这4种组织间无显著差异.上述研究结果提示,CfBMP2可能参与栉孔扇贝的器官组织发生和壳的生长.