东亚飞蝗细胞色素P450基因的克隆及表达分析

• 作者: 刘志刚 李荔 连国云 邬玉兰 陈义昆
• 来源期刊: 应用昆虫学报
• 关键词: 东亚飞蝗 细胞色素P450 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 441-446
• 语种: 中文

摘要

本文克隆了东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis (Meyen)细胞色素P450(cytochrome P450)基因全长,表达重组蛋白,并对其可溶性进行了分析.通过提取东亚飞蝗总的RNA,反转录成cDNA,设计特异性引物,PCR克隆东亚飞蝗细胞色素P450基因,将测序正确的目的片段克隆至原核表达载体pET-28a中,在大肠埃希菌Escherichia coli Rosetta中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测重组蛋白表达结果.结果表明:东亚飞蝗细胞色素P450基因开放阅读框全长为1 551 bp,编码516个氨基酸,与GenBank中已登录的东亚飞蝗细胞色素P450基因(HM153426)的同源性为99％,重组质粒pET-28a-P450在E.coli Rosetta中获得高效表达,重组蛋白相对分子质量(Mr)约为53 000,主要以包涵体的形式存在.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬玉兰	深圳大学医学院	36	133	6.0	8.0
2	刘志刚	深圳大学生命科学学院	324	1724	17.0	23.0
6	李荔	深圳大学生命科学学院	28	143	8.0	10.0
7	陈义昆	深圳大学生命科学学院	6	24	4.0	4.0
8	连国云	深圳大学医学院	9	38	4.0	5.0