产肠毒素大肠杆菌亚单位疫苗3STaM (G)-K99和3STaM (S)-K99的纯化及其免疫学性质的研究

• 作者: 刘昆梅 徐广贤 李敏 杨华 段相国 王玉炯 赵辉 郭乐 韩学波
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 产肠毒素大肠杆菌 黏附素 不耐热性肠毒素 耐热性肠毒素 中和抗体
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 18-24
• 分类号: Q939
• 语种: 中文

摘要

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是一种导致新生犊牛和仔猪腹泻的主要病原体之一.ETEC的毒力因子主要有黏附素(CFs)、不耐热性肠毒素(LT)和耐热性肠毒素(ST)三种.在前期研究中,利用PCR和酶切连接技术成功构建了两种ETEC亚单位疫苗3STaM (G)-K99和3STaM(S)-K99,且在大肠杆菌中获得高效表达.本研究利用阴离子交换层析纯化融合蛋白3STaM (G)-K99 and 3STaM(S)-K99,辅以弗氏佐剂免疫新西兰大白兔,通过Elisa分析其免疫学性质,并利用肠毒素中和实验在昆明系乳鼠中评价其激发抗STa中和抗体的能力.实验结果表明:亚单位疫苗3STaM(G)-K99 and 3STaM (S)-K99能够激发相对较高水平、可针对天然STa、ETEC和融合蛋白STa-K99的特异性抗体.其次,亚单位疫苗中STa突变体(STaM)组分的肠毒素活性显著降低,且其所激发的特异性抗体属于中和抗体,能有效抑制天然STa的肠毒素活性.亚单位疫苗3STaM (G)-K99 and 3STaM(S)-K99为研制预防ETEC感染性腹泻的多价基因工程疫苗提供了基本素材和理论指导.