产肠毒素大肠埃希菌STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体的构建及表达

• 作者: 刘晓明 包少文 曾瑾 李武 杨继辉 邓光存
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 产肠毒素大肠埃希菌 耐热性肠毒素 黏附素 重组腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 30-36
• 页数: 7页
• 分类号: Q789
• 字数: 5009字
• 语种: 中文

摘要

为构建产肠毒素大肠埃希菌(ETEC) STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体Ad STa-K99,通过PCR技术分别克隆了STa及K99基因,并与腺病毒穿梭质粒连接构建了穿梭质粒pAd5 STa-K99,将pAd5STa-K99和骨架质粒(含GFP基因)分别用Pac Ⅰ酶切线性化,利用LipofectamineTM LTX&-PLUS共转染293细胞进行同源重组包装重组腺病毒,通过PCR及Western blot对重组腺病毒进行鉴定.结果显示,重组腺病毒Ad5 STa-K99构建正确并表达融合蛋白,且表达的融合蛋白能够被抗体所识别,为研制由ETEC引起的新生动物腹泻重组腺病毒载体疫苗奠定了基础.