Rspo1基因转染间充质干细胞株的构建及生物学活性鉴定

• 作者: 宋莉 居颂光 居颂文 曹莎莎 葛彦 邓云 陆婷 陈伟
• 来源期刊: 中国血液流变学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Rspo1 间充质干细胞 基因转染细胞
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 592-595,622
• 页数: 5页
• 分类号: R730.3
• 字数: 3770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-881X.2013.04.002

摘要

目的：构建稳定表达Rspo1的基因转染间充质干细胞株。方法将人Rspo1全长cDNA重组入逆转录病毒载体pEGZ-Term，通过与辅助病毒载体共转染293T细胞，包装为具有感染力的完整重组病毒载体，收集培养上清感染间充质干细胞C3H10 T1/2细胞株，筛选获得G418抗性的基因转染细胞，通过RT-PCR与流式细胞术检测感染后C3H10 T1/2细胞Rspo1分子的表达，并采用细胞计数法观察其上清对SW480结肠癌细胞增殖能力的影响。结果成功构建pEGZ-Term/Rspo1逆转录病毒表达载体，获得了稳定表达人Rspo1的基因转染细胞株C3H10/Rspo1，该细胞株上清能促进SW480结肠癌细胞增殖。结论建立了稳定表达Rspo1的基因转染间充质干细胞株，为进一步利用Rspo1和间充质干细胞靶向作用于肠道干细胞救治肠上皮损伤的研究奠定了基础。