BRCA2基因启动子的克隆和分析

• 作者: 刘璐 刘蔚 徐晓婷 王修珍 秦磊 金晓红 顾冬梅
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: BRCA2基因 启动子 克隆 基因调控
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 138-140
• 页数: 3页
• 分类号: Q343.1
• 字数: 2453字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建BRCA2基因启动子的荧光素酶报告质粒,为BRCA2基因调控研究提供基础.方法 采用高保真Taq聚合酶,从正常人外周血中扩增出BRCA2启动子并将其插入质粒中.通过基于PCR的定点突变方法在多态性位点rs3092989(-254A/G)获得含-254G等位基因的序列.亚克隆BRCA2启动子片段至pGL3-basic报告基因载体中,构建含BRCA2启动子的重组报告质粒.转染HeLa细胞,评价启动子活性以及-254A/G多态性位点对活性的影响.结果 酶切和直接测序法证实所构建质粒含有pGL3-basic及BRCA2基因启动子序列,扩增的含-254A和-254G的BRCA2启动子序列正确.构建的报告基因具有启动子活性,与pGL3-basic质粒相比较,BRCA2启动子的相对荧光单位增加了413倍.rs3092989(-254A/G)多态位点未明显影响启动子活性.结论 BRCA2转录起始位点上游序列具有较强的启动子活性.成功克隆BRCA2启动子并引入相关突变,可为后续的基因转录调控研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐晓婷	苏州大学附属第一医院放疗科	80	319	8.0	12.0
2	顾冬梅	苏州大学附属第一医院病理科	44	114	6.0	7.0
3	王修珍	苏州大学附属第一医院病理科	27	126	6.0	10.0
4	秦磊	苏州大学附属第一医院外科	93	364	10.0	13.0
5	刘璐	苏州大学附属第一医院病理科	37	187	9.0	12.0
6	金晓红	苏州大学附属第一医院麻醉科	19	116	4.0	10.0
7	刘蔚	苏州大学附属第一医院病理科	11	15	3.0	3.0