蛋白酶激活受体-2基因靶向shRNA表达质粒的构建及转染食管癌细胞致沉默效应的研究

• 作者: 刘彩虹 谢立群 赵建业 邓全军 郑艳敏 陈金梅
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 食管肿瘤 EC109 小干扰RNA 蛋白酶激活受体2 基因沉默
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 349-351
• 页数: 3页
• 字数: 2804字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.03.006

摘要

目的:构建靶向蛋白酶激活受体-2(PAR-2)基因的shRNA表达质粒,建立PAR-2基因沉默的食管癌EC109稳定细胞株.方法:针对人PAR-2的mRNA序列,设计并体外合成编码shRNA的两条特异性寡核苷酸序列,分别插入pGFP-V-RS质粒中构建2个shRNA表达质粒(PAR-2 shRNA-1、PAR-2 shRNA-2),经过鉴定,然后将表达质粒转染至食管癌细胞EC109中,经嘌呤霉素筛选,获得稳定干扰的细胞株,运用RT-PCR和Western Blot检测PAR-2的表达.结果:PAR-2 shRNA-1转染人食管癌细胞EC109后,PAR-2基因表达在mRNA和蛋白质水平都受到显著抑制,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:成功构建针对PAR-2基因的shRNA表达质粒,转染食管癌细胞EC109,能有效抑制该细胞株PAR-2基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵建业	武警医学院附属医院消化内科	7	21	3.0	4.0
2	谢立群	武警医学院附属医院消化内科	38	153	8.0	10.0
3	邓全军	武警医学院附属医院消化内科	14	47	4.0	6.0
4	郑艳敏	武警医学院附属医院消化内科	12	129	7.0	11.0
5	陈金梅	武警医学院附属医院消化内科	7	34	3.0	5.0
6	刘彩虹	武警医学院附属医院消化内科	1	6	1.0	1.0