血清支链和芳香族氨基酸同位素稀释质谱检测法的建立和应用研究

• 作者: 国汉邦 李红霞 杨睿悦 王抒 董军 赵海建 陈文祥
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 支链氨基酸 芳香族氨基酸 串联质谱法 糖尿病 危险因素
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 3938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2013.05.002

摘要

目的 建立同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)同时测定血清五种支链和芳香族氨基酸(即缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸)的方法,分析其与糖尿病及心血管病危险因素的关系.方法 采用同位素标记被测物作内标,沉淀蛋白后LC/MS/MS分离检测,标准曲线定量;对不同水平血清样本进行五次重复分析,每次每种血清重复分析3份,以考察方法的精密度;测定血清样本添加不同浓度标准品的加样回收率.收集2010年10～12月111例健康志愿者空腹静脉血,离心分离血清,测定血清支链和芳香族氨基酸及传统危险因素指标水平,进行相关性分析.结果 五种氨基酸在该试验条件下分离良好,分析时间约4 min;测定不同血清水平的批内变异系数(CV)为1.56%(1.07%～2.02%),总CV为2.03%(1.14%～3.01%);多次试验的加样回收率范围为98.34%～103.25%.测定111例健康人血清支链和芳香族氨基酸水平与体重指数、空腹血糖、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇酯化速率、肌酐、尿酸、载脂蛋白CII和CIII以及超敏C反应蛋白显著正相关(t=0.000 02～0.046,P值均<0.05);与高密度脂蛋白胆固醇显著负相关(t=0.000 5～0.048,P值均<0.05).结论 该研究建立了简便精密的ID-LC/MS/MS测定血清支链和芳香族氨基酸的方法,有望在糖尿病和心血管病危险分析中发挥作用.