锅柄聚合酶链反应法扩增贵阳腐霉 Pr1基因上游未知序列

• 作者: 于声 段斯亮 苏晓庆
• 来源期刊: 广西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 锅柄聚合酶链反应 上游调控序列 类枯草菌素蛋白酶 染色体步移 贵阳腐霉
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1461-1463
• 页数: 3页
• 分类号: R349.6
• 字数: 1813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11675/j.issn.0253-4304.2013.11.10

摘要

目的：在灭蚊真菌贵阳腐霉Pr1基因已知序列的基础上，利用锅柄聚合酶链反应法扩增Pr1基因上游未知序列。方法首先采用限制性内切酶BamHⅠ对基因组DNA进行完全酶切，用小牛肠碱性磷酸酶去磷酸化后，与5′磷酸化的寡核苷酸链连接，经过变性、链内退火和聚合酶延伸形成锅柄状，最后进行嵌套式PCR。结果获得了Pr1基因已知序列上游864bp核苷酸序列，GenBank登录号为：JQ975036。结论锅柄聚合酶链反应法可以高度有效地扩增与已知位点相邻的基因组片段，是一种可靠的染色体步移法，有利于Pr1基因全长的克隆。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏晓庆	贵阳医学院生物学教研室	46	370	10.0	17.0
2	于声	广西科技大学医学院检验教研室	13	44	4.0	6.0
3	段斯亮	广西科技大学医学院病原生物学与免疫学教研室	12	33	3.0	5.0