泰勒焦虫表面抗原Tams1、SPAG1和TaSP基因的克隆与表达

• 作者: 易忠 王延 米晓云 苗书魁 薛英 陈智 马文戈 魏婕 魏玉荣
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 泰勒焦虫 表面抗原 真核表达
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 页码范围: 2136-2142
• 页数: 7页
• 分类号: S852.6
• 字数: 4626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2013.11.025

摘要

[目的]以真核表达系统串联表达环形泰勒焦虫表面抗原Tams1、SPAG1和TaSP的高免疫原性区片段,为研究焦虫重组串联蛋白免疫原性奠定基础.[方法]以悬浮培养泰勒焦虫细胞为材料,利用SOEing-PCR方法将Tams1、SPAG1和TaSP蛋白高免疫原性区基因通过柔性氨基酸串联嵌合在乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的主要免疫优势区,构建模拟表位-HBc嵌合蛋白真核表达质粒,转染BHK-21细胞,通过Western-Blot检测目的基因表达产物.[结果]Western-Blot分析显示,阳性质粒转染BHK-21细胞裂解产物在硝酸纤维素膜上呈现特异性条带,大小与预期分子量相当;正常BHK-21细胞裂解产物未呈现相应的条带.[结论]重组嵌合蛋白在真核表达系统中成功表达.