泰勒虫重组抗原Tams1-spag基因原核表达与纯化

• 作者: 任方 易忠 汪丽群 王延 米晓云 苗书魁 郭会玲 马文戈 魏婕
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 环形泰勒虫 重组蛋白 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 43-47
• 页数: 5页
• 分类号: S852.7
• 字数: 4676字
• 语种: 中文

摘要

为了在低成本的情况下,得到高浓度、高纯度的环形泰勒虫表面重组抗原的融合蛋白,设定表达过程中不同的OD600 nm、IPTG浓度与诱导时间,探索最佳表达条件.通过KCl染色法切胶后分别经透析袋电洗脱法与快速离心法回收目的蛋白.对上述试验的蛋白样品进行SDS-PAGE和Western blot检测.结果表明,在OD600 nm=1时加入浓度为1 mmol/L IPTG,过夜诱导时,重组蛋白的表达量最大.在KCl染色法切胶回收目的条带的基础上,电洗脱法与快速离心法均能得到同等浓度的高纯度目的蛋白,经Western blot检测重组蛋白的生物活性没有改变,仍具有良好的反应原性.