摘要:
目的 观察熊果酸(ursolic acid,UA)玻璃体内注射对小鼠氧诱导视网膜病变的保护作用.方法 将7d龄清洁级C57BL/6J小鼠120只,用随机数字表法随机分为6组:空白对照组、模型对照组(PBS液)、阳性对照组(曲安奈德对照)和低剂量、中剂量、高剂量UA干预组,每组20只小鼠(均取右眼为实验对象).空白对照组小鼠在空气中喂养,其他各组小鼠制备氧诱导视网膜病变模型.造模成功后,各组立即给予相应的药物治疗:模型对照组小鼠玻璃体内注射PBS液3μL,低剂量、中剂量、高剂量UA干预组小鼠玻璃体内分别注射1.5 μg·L-1、3.0 μg·L-1、6.0 μg·L-1UA各3μL,阳性对照组小鼠玻璃体内注射曲安奈德(1 mL:40 mg)3 μL.17 d龄时过量麻醉处死小鼠,摘除眼球制备视网膜组织切片,HE染色,计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数,利用免疫组织化学法检测视网膜组织中VEGF、COX-2及MMP-2的阳性表达.结果 模型对照组小鼠每张切片突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数为(18.65±3.24)个,明显高于空白对照组的(0.78±0.11)个,高剂量、中剂量UA干预组分别为(7.93±1.09)个和(13.32±1.87)个,均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).不同组别视网膜组织中COX-2、VEGF和MMP-2蛋白的积分光密度值比较:模型对照组明显高于空白对照组,高剂量、中剂量UA干预组均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).视网膜HE染色结果显示,空白对照组内界膜结构均一,血管内皮细胞排列整齐,偶见血管内皮细胞突破内界膜;模型对照组可见大量血管内皮细胞团突破内界膜,形成新生血管腔;低剂量UA干预组与模型对照组结果基本相似;高剂量UA干预组与阳性对照组结果接近,可见少量血管内皮细胞核突破内界膜,内界膜结构较均一,新生血管腔少见.结论 UA通过降低视网膜组织中的VEGF、COX-2及MMP-2的表达,抑制氧诱导小鼠视网膜病变模型新生血管的形成,并与UA的剂量呈正相关,对视网膜具有保护作用.