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摘要:
本实验旨在对猪新基因FAM134B基因进行全长克隆,尝试有效沉默FAM134B基因的干扰表达裁体的枸建和筛选,并筛选出沉默FA M134B基因的稳定阳性细胞.设计合成3对FAM134B基因的特异性发夹siRNA干扰片段,将其克隆入干扰载体pYr-1.1,构建可沉默FAM134B基因的siRNA表达载体FAM134B-1、FAM134B-2和FAM134B-3,采用LipofectamineTM (Lip) 2000介导质粒转染肌内前体脂肪细胞,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果,并进一步用G418进行了稳定转染siRNA的肌内前体脂肪细胞筛选.结果表明:FAM134B基因的全长克隆成功,其siRNA表达载体构建正确,通过稳定筛选后,干扰效率较高的FAM134B-3表达载体和稳定转染FA M134B-3的细胞为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞,干扰效率达65.0%.本研究成功克隆了新基因FAM134B的全长以及构建了有效沉默FA M134B基因表达的干扰载体,并筛选出了稳定沉默的阳性肌内前体脂肪细胞,为进一步研究FAM134B基因在脂肪沉积中的功能研究奠定了基础.
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文献信息
篇名 猪新基因FAM134B的克隆及稳定干扰肌内前体脂肪细胞阳性克隆的筛选
来源期刊 中国畜牧杂志 学科 农学
关键词 FAM134B基因 小干扰RNA 质粒转染 稳定筛选肌内前体脂肪细胞
年,卷(期) 2013,(9) 所属期刊栏目 遗传育种
研究方向 页码范围 10-14
页数 5页 分类号 S828.2
字数 4305字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 袁章琴 1 6 1.0 1.0
2 任阳 1 6 1.0 1.0
3 汪以真 2 25 2.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
FAM134B基因
小干扰RNA
质粒转染
稳定筛选肌内前体脂肪细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国畜牧杂志
月刊
0258-7033
11-2083/S
大16开
北京市海淀区圆明园西路2号院56号楼1层101、102
82-147
1953
chi
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