白菜型冬油菜铁超氧化物歧化酶（Fe-SOD）基因的克隆及表达分析

• 作者: 刘自刚 史鹏辉 孔德晶 孙万仓 孙佳 方彦 曾秀存 杨刚 武军艳 许耀照
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 白菜型油菜 低温 Fe-SOD 表达分析 SOD活性
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 4603-4611
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.21.024

摘要

[目的]了解 SOD 酶蛋白家族Fe-SOD在超强抗寒冬油菜中的表达情况及其在低温胁迫下的作用。[方法]采用RT-PCR技术克隆超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号Fe-SOD的cDNA序列。对该序列进行生物信息学分析，采用半定量以及相对定量RT-PCR研究Fe-SOD在低温胁迫下的表达模式，采用氮蓝四唑（NBT）光还原法测定冬油菜叶片和根中的总SOD酶活性。[结果]获得Fe-SOD，GenBank登录号为KF178713，该基因cDNA片段全长645 bp，包含一个639 bp完整的开放阅读框，编码212个氨基酸的蛋白质，与白菜(Chiifu)的蛋白质氨基酸序列同源性高达99%。该基因编码的酶蛋白是1个主要由α-螺旋组成的亲水性稳定蛋白，无信号肽，无跨膜结构域。Fe-SOD表达模式分析显示初期低温胁迫下（4℃），该基因上调表达，继续低温胁迫处理（-4℃和-8℃），Fe-SOD表达量受到抑制。总SOD酶活性测定显示冬油菜根中酶活性高于叶片，以利于冬油菜安全越冬。[结论]从白菜型冬油菜克隆的Fe-SOD具有已知物种Fe-SOD的特征。Fe-SOD在冬油菜品种陇油7号抗寒过程中起作用。