斜带石斑鱼IgZ重链基因的表达纯化和抗体制备

• 作者: 姚占娟 崔淼 张其中
• 来源期刊: 广东农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜带石斑鱼 免疫球蛋白Z 原核表达 多克隆抗体制备
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 149-152
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 4280字
• 语种: 中文

摘要

为获得斜带石斑鱼IgZ重链基因的多克隆抗体,成功构建了斜带石斑鱼免疫球蛋白IgZ重链重组蛋白表达质粒pQE30/IgZ,将其转化到大肠杆菌表达菌株M15中,确定了最佳诱导表达条件:IPTG 0.2 mmol/L,诱导温度30℃,诱导时间6h.所获得的IgZ重链重组蛋白经Ni-NTA亲和层析后,纯度达到85％以上；以纯化的IgZ重链重组蛋白为抗原免疫新西兰兔,制备出相应的多克隆抗体,经ELISA测定抗血清效价约为1:320 000.