幽门螺杆菌热休克蛋白A核酸疫苗的构建

• 作者: 余文发 孙瑞利 朱琳琳 杨建斌 王凡平 王明永 赵东方 郭庆合 马淑君
• 来源期刊: 中华医院感染学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 核酸疫苗 hspA基因
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1772-1774
• 分类号: R378
• 语种: 中文

摘要

目的 构建幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A (HspA)亚单位核酸疫苗,为进一步研制Hp核酸多价疫苗提供技术平台.方法 以PMD-HspA为模板,扩增、纯化Hp hspA基因,插入到真核表达载体PcDNA3中,转化大肠埃希菌DH5a,经氨苄西林抗性筛选阳性克隆,得到重组核酸疫苗pcDNA3-HspA,用特异性PCR方法和小提质粒酶切电泳鉴定重组质粒,同时将pcDNA3-HspA进行测序,进一步确定是否构建成功及鉴定构建过程中是否发生基因突变.结果 PCR鉴定结果显示,扩增产物为0.36 kb的目的基因；酶切鉴定结果显示,得到5.45 kb克隆载体片段和0.36 kb的目的基因片段；重组质粒pcDNA3-HspA测序,得到基因全长357 bp目的基因片段,与克隆质粒测序图比较,无基因变异.结论 成功构建了Hp单价核酸疫苗pcDNA3-HspA,为研制Hp核酸多价疫苗奠定基础.