幽门螺杆菌重组Bb-hpaA-vacA疫苗的构建

• 作者: 吴利先 王国富 高峰
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 双歧杆菌 重组hpaA-vacA疫苗 构建
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 131-134
• 分类号: R378
• 字数: 3655字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2012.02.009

摘要

目的 构建幽门螵杆菌(Hp)重组双歧杆菌(Bb)Bb-hpaA-vacA疫苗.方法 通过PCR分别扩增hpaA和va-cA抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接hpaA和vacA,得到hpaA-vacA融合基因;将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-hpaA-vacA,电穿孔法将该质粒导入Bb,构建幽门螺杆菌重组hpaA-vacA疫苗,然后用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达的重组蛋白.结果 PCR成功扩增出分子量约为1500 bp的hpaA-vacA融合基因,双酶切证实hpaA-vacA融合基因成功插入pGEX-1λT中,并成功转化入双歧杆菌,而且重组蛋白能在双岐杆菌中得到正确表达,Western blotting显示重组蛋白具有免疫原性.结论成功构建螺杆菌rBb-hpaA-vacA疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定了基础.