球形幽门螺杆菌vacA基因的克隆及序列测定

• 作者: 汪雪峰 王克霞
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 vacA基因 基因克隆 序列测定
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 351-354
• 页数: 4页
• 分类号: R378.99
• 字数: 2795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2004.04.011

摘要

目的:克隆球形幽门螺杆菌(HpC)vacA基因全长片段,并进行序列分析.方法:采用亚抑菌浓度的抗生素作用,使幽门螺杆菌(Hp)标准株NCTC11637发生球形变异,收集球形Hp.从HpC基因组DNA中特异扩增出vacA基因片段,扩增的目的片段经纯化回收后克隆到pMD-18T中,转化入大肠杆菌JM109.阳性重组质粒用PCR及双酶切鉴定,并进行序列测定.结果:从HpC基因组DNA中扩增出3 888bp的vacA基因,构建重组质粒pMD-18T-vacA,酶切产物的大小与预期相符.测序结果显示,HpC与已公布的Hp vacA基因序列的同源性达99.8%.结论:成功地对HpC vacA基因进行体外扩增及构建原核重组质粒pMD-18T-vacA,并经酶切及序列分析所验证,证明HpC含有完整的vacA基因,其可能与Hp的致病性有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王克霞	安徽理工大学医学院病原生物学教研室	99	774	13.0	24.0
2	汪雪峰	安徽理工大学医学院病原生物学教研室	30	65	4.0	5.0