幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的克隆及在大肠杆菌和双歧杆菌中的表达

• 作者: 吴利先 王国富 薛士鹏 高峰
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 融合基因vacA-hpaA 双歧杆菌 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2011,（35）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4388-4391,4395
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 3601字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒,并观察其在大肠杆菌(E.coli)和双歧杆菌(B.bifidium)中的表达情况.方法 通过PCR得到hpaA-vacA融合基因,将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-hpaA-vacA,电穿孔转化入大肠杆菌BL21和双歧杆菌.转化菌经IPTG诱导,然后用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达的重组蛋白.结果 构建了重组质粒pGEX-vacA-hpaA,vacA-hpaA融合基因的分子量约为1548bp;经SDS-PAGE分析,在大肠杆菌中表达出85kD的融合蛋白,表达的蛋白约占细菌总蛋白的20.5％；在双岐杆菌中也能得到正确表达,但表达量较大肠杆菌低,占细菌总蛋白约8.5％.Western blotting结果确认了该条带为hpaA-vacA融合基因的产物.结论 构建的重组质粒pGEX-hpaA-vacA能够在大肠杆菌及双歧杆菌中获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高峰	大理学院基础医学院微生物学教研室	10	30	3.0	5.0
2	吴利先	大理学院基础医学院微生物学教研室	52	158	8.0	9.0
3	王国富	大理学院基础医学院微生物学教研室	25	76	5.0	6.0
4	薛士鹏	大理学院基础医学院微生物学教研室	9	17	3.0	3.0