幽门螺杆菌全长hpaA基因克隆和在大肠杆菌中高效表达

• 作者: 朱森林 李国庆 胡品津 陈为 陈旻湖 陈洁
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 hpaA基因 大肠杆菌 疫苗 重组
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 527-530
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2
• 字数: 2403字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2001.06.011

摘要

为了构建幽门螺杆菌(H. pylo ri)全长hpaA基因表达质粒,在大肠杆菌中表达重组HpaA(reHpaA)蛋白, 我们用PCR扩增全长hpaA基因,经适当的酶切-连接反应将其连入原核表达质粒pTrc99A, 反应产物转化大肠杆菌JM105, 用Amp(+)培养基筛选, 提取重组菌质粒,PCR和酶切鉴定, 筛选阳性克隆, 并用重组菌质粒进行hpaA基因测序.阳性克隆经IPTG诱导培养, 用SDS-PAGE电泳和Western blo t进行reHpaA表达分析和鉴定, 用薄层扫描分析reHpaA含量.结果显示, 重组质粒pTrc99A- hpaA经PCR和酶切后均产生783bp hpaA基因.重组菌能表达约30kD reHpaA蛋白,含量占全菌体蛋白量的51.99%,Western blot证实其有免疫反应性.重组H. pylori HpaA表达质粒的成功构建及在大肠杆菌中高效表达的实现, 为探索制备H. pylori疫苗奠定了一定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡品津	中山医科大学第一医院消化内科	57	1023	12.0	31.0
2	陈旻湖	中山医科大学第一医院消化内科	22	649	10.0	22.0
3	陈为	中山医科大学第一医院消化内科	21	359	10.0	18.0
4	朱森林	中山医科大学第一医院消化内科	10	124	7.0	10.0
5	陈洁	中山医科大学第一医院消化内科	11	152	9.0	11.0
6	李国庆	中山医科大学第一医院消化内科	3	24	2.0	3.0