转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定

• 作者: 周欢敏 孟凡华 房君 王海涛
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 拟蜘蛛牵丝蛋白基因 细毛羊成纤维细胞 脂质体转染 鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（22）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 9305-9308
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 4120字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立合有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系.[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达.[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好(细胞生长曲线呈S型)、染色体数目为2n =54;通过G418筛选出共43株单克隆细胞系,经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株,其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA.[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系,为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟凡华	内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室	14	25	3.0	4.0
2	周欢敏	内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室	86	473	10.0	19.0
3	房君	内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室	7	11	3.0	3.0
4	王海涛	内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室	5	11	3.0	3.0