烟草DXS基因的克隆及其亚细胞定位分析

• 作者: 丁安明 冯全福 徐剑 李尊强 杨爱国 焦惠鹏 王春军 高堃宇
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS) 绿色荧光蛋白(GFP) 亚细胞定位 叶绿体
• 年，卷（期）: 2013,（30）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 11957-11960
• 页数: 4页
• 分类号: S572
• 字数: 3296字
• 语种: 中文

摘要

[目的]从烟草cDNA中扩增出1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)基因(去除终止密码子TAA),并对其进行亚细胞定位分析.[方法]利用RT-PCR技术分离、克隆DXS,将烟草DXS基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因重组构建亚细胞定位表达载体,转入根癌农杆菌LBA4404后注射侵染本氏烟烟草幼苗进行瞬时表达;并利用激光共聚焦扫描显微镜观察转GFP植株的表达情况.[结果]显微镜观察发现,DXS和GFP融合蛋白仅在本氏烟叶肉细胞(尤其是保卫细胞)的叶绿体中产生绿色荧光,DXS基因在叶绿体中特异表达.[结论]DXS定位在叶绿体中,为接下来对DXS基因功能研究提供了理论依据.