版纳微型猪近交系CMAH基因克隆及亚细胞定位研究

• 作者: 宋雪 张霞 曾日彬 李罗刚 潘伟荣 王淑燕 王配 霍海龙 霍金龙
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 胞苷磷酸-N-乙酰神经氨酸羟化酶 基因克隆 版纳微型猪近交系 载体构建 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 页码范围: 94-98
• 页数: 5页
• 分类号: S828.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2019.0062

摘要

胞苷磷酸-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)在免疫应答、炎症及肿瘤转移过程中起着重要的作用.前期发现其在版纳微型猪近交系(BMI)颌下腺、脾脏和舌下腺中高表达,且均显著高于其他组织,提示该基因可能在免疫排斥反应中发挥作用.本研究通过前期已成功扩增并且确定的编码区序列,设计带有酶切位点的引物并进行克隆,酶切连接法构建其真核表达载体,通过脂质体法转染猪肾上皮细胞系PK15,通过倒置荧光显微镜检测蛋白表达情况.获得BMICMAH基因的包含有酶切位点的CDS序列1 746 bp,并且成功构建真核表达载体pEGFP-C1-CMAH.结果 表明,该基因编码蛋白主要定位于PK15细胞的细胞质中,部分细胞核中也有表达.上述结果为进一步研究该基因编码蛋白的功能奠定了基础.